香港三级日本三级三级韩级一-香港三级日本三级人妇网站-香港三级日本三级人妇电影精品-香港三级日本三级韩国a-成人欧美一区二区三区视频不卡-成人欧美一区二区三区视频

熱門搜索: 硫酸角質(zhì)素(KS)ELISA試劑盒(種屬:魚) 白介素6(IL6)ELISA試劑盒(種屬:魚) 魚白介素10(IL10)ELISA試劑盒發(fā)貨及時 斑馬魚白介素12BELISA試劑盒發(fā)貨及時 兔載脂蛋白B(apo-B)ELISA試劑盒發(fā)貨及時 兔孕酮(PROG)ELISA試劑盒發(fā)貨及時 兔羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒發(fā)貨及時 兔抗酒石酸酸性磷酸酶ELISA試劑盒發(fā)貨及時 兔晶體蛋白α(Cryα)ELISA試劑盒發(fā)貨及時 兔結(jié)締組織生長因子ELISA試劑盒發(fā)貨及時 兔基質(zhì)金屬蛋白酶9ELISA試劑盒發(fā)貨及時 兔肺表面活性物質(zhì)相ELISA試劑盒發(fā)貨及時 CD206分子ELISA試劑盒(種屬:小鼠) CC趨化因子受體6ELISA試劑盒(種屬:小鼠) 阻抑素(PHB)ELISA試劑盒(種屬:大鼠) 中性內(nèi)肽酶;腦啡ELISA試劑盒(種屬:大鼠)

技術(shù)文章/ Technical Articles

您的位置:首頁  /  技術(shù)文章  /  (VEGF-B),大鼠血管內(nèi)皮生長因子BELISA試劑盒操作原理

(VEGF-B),大鼠血管內(nèi)皮生長因子BELISA試劑盒操作原理

更新時間:2018-05-14      瀏覽次數(shù):1563

大鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒僅供研究使用

 

大鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒實驗?zāi)康?/strong>

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中大鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)的含量。

有效期:6個月

保存條件:2-8℃

 

 

 

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被大鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

 

 

 

大鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成96孔配置48孔配置備注
微孔酶標板8孔×12條8孔×6條 無
標準品0.3mL×6管0.3mL×6管
樣本稀釋液6mL3mL
檢測抗體-HRP10mL5mL
20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋
底物A6mL3mL
底物B6mL3mL
終止液6mL3mL
封板膜2張2張
說明書1份1份
自封袋1個1個

備注:

1. 標準品濃度依次為:400、200、100、50、25、0 pg/mL

2. 經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

 

 

 

樣本處理及要求

1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注:標本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

 

 

 

需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

 

 

 

試劑準備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

 

 

 

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

 

 

注意事項

1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產(chǎn)品。

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

 

 

 

洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。

自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

 

 

 

實驗結(jié)果計算

以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。

Elisa試劑盒標準曲線圖

(此圖僅供參考)

 

 

 

大鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒性能

1. 檢測范圍:12.5 pg/mL – 400 pg/mL。

2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。

3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。

微信掃一掃

郵箱:2450868877@qq.com

傳真:86-區(qū)號-傳真號碼

地址:上海市楊浦區(qū)鐵嶺路32號1519-10室

Copyright © 2024 上海仁捷生物科技有限公司版權(quán)所有   備案號:滬ICP備16052159號-1   總訪問量:263918   技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

TEL:17302193538

掃碼加微信
主站蜘蛛池模板: 久久91精品国产91久久户| 欧美一页| 国产一级精品视频| 国产成人精品999在线观看| 一区二区三区视频| 中文在线免费看视频| 国产精品久久久久久一区二区| 成人毛片在线播放| 国产精品麻豆视频| 亚洲图片国产日韩欧美| 香蕉视频在线免费看| 永久在线观看| 国产一区二区高清视频| 日本高清一区二区三区不卡免费| 视频一区 中文字幕| 国产在线精品一区二区三区| 免费看欧美日韩一区二区三区 | 久久综合精品国产一区二区三区| 日韩国产免费| 欧美亚洲精品在线| 欧美日韩另类在线| 亚洲三级一区| 欧美成a人片在线观看| 久久免费视频网站| 精品国产网站| 亚洲欧美网| 欧美亚洲激情| 欧美va在线| 国产美女视频黄a视频免费全过程| 精品久久成人| 亚洲欧洲精品一区二区三区| 北条麻妃 在线| 亚洲欧美综合区自拍另类| 欧美人xxx| 亚洲欧美国产精品第1页| 亚洲精品影院久久久久久| 一区在线播放| 国产精品成人久久久久久久| 国产午夜电影在线观看| 亚洲欧美日韩精品高清| 一级毛片一级毛片|